核糖核酸检测步骤

2024-05-18 01:33

1. 核糖核酸检测步骤

1、核酸提取使用硅胶柱离心、磁性硅胶颗粒分离方法以及自动化仪器等商品化试剂或设备并按说明书操作。提取RNA时应注意防止RNA降解。DNA应置于-20℃保存,RNA和需长期保存的DNA应置于-80℃保存。
2、逆转录合成cDNA。逆转录cDNA合成反应需使用逆转录引物、dNTPs、逆转录酶、RNA酶抑制剂、DTT、缓冲液和适量无RNA/DNA酶的超纯水以及RNA模板。在扩增仪或水浴箱中,在规定的温度和时间下进行逆转录反应。
3、PCR扩增反应PCR反应需使用引物、dNTPs、DNA聚合酶、缓冲液、和适量无RNA/DNA酶超纯水、以及模板。在扩增仪中,按照设定的程序进行扩增。使用二次扩增的套式PCR扩增方法。
4、扩增产物定性分析;扩增产物常用分析方法是琼脂糖凝胶电泳法,与分子量标准比较,判断扩增片段是否在预期的分子量范围内。其它扩增产物分析方法还有限制性内切酶酶切分析、特异性探针杂交分析以及DNA序列分析等。
5、结果判定和完成报告单:每一次检测需同时做两个阳性对照、两个阴性对照,只有阳性对照扩增出预期的片段、阴性对照没有扩增出任何片段、双份平行样品结果一致的情况下实验才成立,可以作出核酸阳性或阴性反应结果的判定。
扩展资料:
检测新型冠状病毒特异序列的方法最常见的是荧光定量PCR。因PCR反应模板仅为DNA,因此在进行PCR反应前,应将新型冠状病毒核酸逆转录为DNA。在PCR反应体系中,
包含一对特异性引物以及一个Taqman探针,该探针为一段特异性寡核苷酸序列,两端分别标记了报告荧光基团和淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;
如反应体系存在靶序列,PCR反应时探针与模板结合,DNA聚合酶沿模板利用酶的外切酶活性将探针酶切降解,报告基团与淬灭基团分离,发出荧光。
每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子产生。荧光定量PCR仪能够监测出荧光到达预先设定阈值的循环数与病毒核酸浓度有关,病毒核酸浓度越高, Ct值越小。不同生产企业的产品会依据自身产品的性能确定本产品的阳性判断值。
参考资料:百度百科——核酸检测法

核糖核酸检测步骤

2. 核糖核酸检测怎么做

核酸检测怎样检测的?首先是取病人的唾液或者咽拭子的样本。提取病人唾液或者咽拭子的样本里的遗传物质,如果病人有病毒,则样本里就会有该病毒的遗传物质RNA。
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核酸检测怎样检测的
1 、取病人的唾液或者咽拭子的样本。
2、 提取病人唾液或者咽拭子的样本里的遗传物质,如果病人有病毒,则样本里就会有该病毒的遗传物质RNA。
3、 进行提取液中RNA的逆转录,把RNA逆转录成cDNA。
4 、用病毒cDNA的特异性引物进行PCR扩增。
5 、若果有扩增出病毒的DNA条带,则判定病人体内有该病毒。
6、 若果没有扩增出DNA条带,则判定病人体内无该病毒。

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做核酸检测是免费的吗
检测所需经费,原则上由市、区财政按1:1比例分担。个人不需要承担任何费用。如检测结果为阳性,相关部门将会第一时间联系该居民,根据诊疗和防控要求进行规范处置。如果居民朋友没有接到相关通知,则检测结果为阴性。

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为什么要开展大规模核酸检测
开展核酸和抗体检测,最直接的原因就是疫情防控需要。
当前,疫情防控向好态势进一步巩固,但外防输入、内防反弹的任务仍然繁重。比如,个别地方发生聚集性疫情。再比如,无症状感染者备受关注。除了疫情需要,复产、复工、复学也需要。

3. 什么是核酸检测?

核酸检测的 常规步骤是 医护人员穿具防护服 双手用酒精消毒 佩戴无菌手套 然后打开检测盒的包装 一手拿压舌板 按压舌头 另一只手拿无菌的棉签 以灵敏而轻柔的动作 沾取受检查者 咽喉部扁桃体部位的分泌物 取样完毕

什么是核酸检测?

4. 什么是核酸检测?

作为新冠状病毒的筛选手段,核酸检测被推到了大众视野之中,那么核酸检测到底是什么呢?核酸检测的物质是病毒的核酸。核酸检测是查找患者的呼吸道标本、血液或粪便中是否存在外来入侵的病毒的核酸,来确定是否被新冠病毒感染。因此一旦检测为核酸“阳性”,即可证明患者体内有病毒存在。新冠病毒感染人体之后,首先会在呼吸道系统中进行繁殖,因此可以通过检测痰液、鼻咽拭子中的病毒核酸判断人体是否感染病毒。所以说,核酸检测阳性可以作为新型冠状病毒感染确诊的金标准。
现在疫情防控仍然是非常严峻,无论是上学还是工作,好多学校及单位都是要求结果阴性的报告单。
1、阳性代表的是感染了新冠病毒,阴性代表的是没有感染。核酸检测是在实验室的条件下,通过分析致病微生物DNA或者RNA基因学的序列,进行临床病因学的确诊。
2、此种核酸检测的方法是利用PCR扩增的方法进行检测,需要很多的步骤,最快也要6个小时才能出结果。此种检测灵敏度高、成本高,完全手工操作,工作量非常大,同时要求实验室的条件也非常高。它是目前及早确定病人是否感染病毒,并且及早发现和及早治疗最有效的检测方法。

5. 核酸检测是检测核酸吗

核酸检测的物质是病毒的核酸。核酸检测是查找患者的呼吸道标本、血液或粪便中是否存在外来入侵的病毒的核酸,来确定是否被新冠病毒感染。因此一旦检测为核酸“阳性”,即可证明患者体内有病毒存在 。
新冠病毒感染人体之后,首先会在呼吸道系统中进行繁殖,因此可以通过检测痰液、鼻咽拭子中的病毒核酸判断人体是否感染病毒。 所以说,核酸检测阳性可以作为新型冠状病毒感染确诊的新标准。

核酸检测是检测核酸吗

6. 什么是核酸检测

核酸检测的 常规步骤是 医护人员穿具防护服 双手用酒精消毒 佩戴无菌手套 然后打开检测盒的包装 一手拿压舌板 按压舌头 另一只手拿无菌的棉签 以灵敏而轻柔的动作 沾取受检查者 咽喉部扁桃体部位的分泌物 取样完毕

7. 核糖核酸有什么区别??

一、结构:dna的分子组成为脱氧核糖核苷酸,rna的分子组成为核糖核苷酸;
二、异同点:
1、含义不同:DNA的为脱氧核糖,RNA的为核糖。
2、范围不同:DNA的碱基为腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶,RNA的为腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、尿嘧啶。
3、表示不同:DNA为双链,RNA为单链。


核糖体RNA特点
(1)含量高,rRNA是细胞内含量最高的RNA,占细胞总RNA的80%~85%。
(2)寿命长,rRNA更新慢,寿命长。
(3)种类少,原核生物有5S、16S、23s三种rRNA,约占核糖体质量的66%(其中5S,23SrRNA占核糖体大亚基的70%,16S rRNA占核糖体小亚基的60%);真核生物主要有5S、5.8S、18S、28S四种rRNA,另有少量线粒体rRNA、叶绿体rRNA。大肠杆菌16SrRNA的3'端有一段保守序列 ACCUCCU,可与mRNA中的SD序列互补结合。
以上内容参考:百度百科-核糖核酸

核糖核酸有什么区别??

8. 什么是核酸检测?

新冠疫情爆发,给全球核酸检测市场带来巨大影响,中国也在积极采取措施应对。继北京、上海、深圳等多地宣布将实行大规模的新冠病毒核酸检测后,中国各地相继公布核酸检测试剂盒和新型冠状病毒的试剂名单。同时,根据世卫组织最新数据,截至目前国外累计确诊病例已经超过了40万例。尽管疫情对核酸检测行业产生了不小的冲击和影响,但在近日发布的半年报中,一些新冠防控领域高增长的公司业绩却喜人:不少公司第一季度营收同比上涨20%-40%;归母净利润同比增长80%-100%等。

新冠病毒的核酸检测技术主要分为两大类:非侵入式(非侵入性)和侵入式(侵入性)两类,其中,在新冠病毒检测中,试剂盒是核心,占到80%。据卫健委官网数据显示,截至2020年5月31日,全国累计新冠肺炎确诊病例175万例。其中武汉市累计确诊病例142万例(含无症状感染者41万例)。与2019年相比,武汉新增病例数减少了74%[1]。因此新冠疫情的爆发让新冠检测进入了“抢跑”阶段。 

新冠病毒是一种新型的病毒,它在人体内没有特异性感染人群,但会在人与人之间传播。新冠病毒感染后,早期会出现发热、咳嗽、咳痰等症状,通过医学手段很难确诊,甚至需要进行病毒核酸检测才能确诊。新冠疫情的出现给我国新冠检测行业带来了机遇和挑战。 新冠病毒快速传播能力较强、传播范围较广等特点使得我国疫情防控面临严峻挑战。为提高我国疫情防控工作效率和准确率、控制疫情蔓延速度,国务院联防联控机制综合组要求医疗机构加强对新冠病毒核酸检测工作 

目前,核酸检测市场由国外企业主导,国内企业较少。国外巨头在核酸检测领域拥有丰富科研经验和技术储备,且核酸检测设备和试剂等核心技术均为自主开发。据 Illumina官网数据显示,美国和加拿大主要是通过收购、技术合作、自研和代理等方式形成核酸检测业务,其中自研产品占比较高。从产品种类来看, NGS和 PCR试剂盒占90%以上(美国超过80%),其余主要是核酸提取试剂、 PCR试剂盒、配套试剂等。